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生物资讯 > 科研进展 > 活细胞研究的新技术

活细胞研究的新技术

最后更新:2009-11-23 阅读次数: 【字体:
  来自华盛顿大学蛋白组学技术和应用研究所提研究成果,研究人员为了揭示一片活叶样品中初级和次级代谢产物的分布,克服样品本身厚度的困难,发现了一种活细胞研究新技术。 
  领导这一研究的是华盛顿大学分子生物学,生物化学和化学方面的专家Akos Vertes教授,他介绍说,了解细胞的内部成分是理解健康细胞不同于病变细胞的关键。直到现在,唯一的方法是观察单个细胞的内部,然后将其从动物或植物中移除,或者改变细胞的生存环境。但是这么做的话,会使细胞发生变化。科学家还不是很清楚一个细胞在病变时与健康细胞的差别,或者当它们从一个环境移到另一个环境中产生的变化。因此Vertes等人希望能从另外一个方面来进行活细胞分析,在他们的一项关于活叶样品中初级和次级代谢产物分布的研究中,研究人员发现叶片中积累基质很厚,常导致光谱末端低分子量部分模糊,而且基质辅助激光解析电离(MALDI)质谱分析需要在真空中进行,但活体样本在真空中无法存活。 
  实际上,MALDI质谱分析的原理是将分析物分散在基质分子中并形成晶体,当用激光照射晶体时,由于基质分子经辐射所吸收的能量,导致能量蓄积并迅速产热,从而使基质晶体升华,致使基质和分析物膨胀并进入气相。而生物样品也可以直接吸收能量的,比如2.94mm波长的光能激活水中氢氧键。 
  Vertes等人想到复合两种技术来解决这一问题。首先他们利用大气压红外线(an  atmospheric  pressure  infrared,APIR)MALDI激光直接激活组织中的水分,使样品气化,就像是组织表面发生了细胞大小的核爆炸,从而获得了离子化微粒,进入质谱中进行分析。但是并不是所有的气化微粒都带电,大部分其实是不带电的,会被APIR  MALDI遗漏。 
  为了捕捉这些中性粒子,Vertes等人采用了第二种方法:LAESI  (laser  ablation  electrospray  ionization,激光烧蚀电喷雾电离,生物通译),这种方法能捕捉大量带电微滴的微粒,然后重新电离化。通过对整个样品进行处理,复合这两种方法,就能覆盖更多的分子,分析质量更高。 
  与大部分质谱成像过程不同,Verte的方法还在成像中增加了高度,从而实现了3D代谢物成像。这项技术的分辨率是直径10mm、高度30mm,这与生物天然的立体像素相吻合,这样科学家们就可以获得天然构像。 
提示:本文活细胞研究的新技术属于科研进展文章,主要介绍细胞研究方面的知识,内容仅供学习交流与参考,不代表中生网的观点。
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