检测DNA分析细胞周期

最后更新：2007-11-18 阅读次数： 【字体：小 中 大】

Ⅰ、样品准备　准备以下一种或几种样品
A、组织单细胞悬浮液（如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞）
B、组织培养细胞
C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞
Ⅱ、反应体系－DNA低渗缓冲液
柠檬酸三钠  　    　　0.25g
Triton-X 100          0.75ml
Propidium iodide      0.025g
核糖核酸酶　　　　  　0.005g
蒸馏水　　　　　　　　250ml
我们将该DNA低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失
Ⅲ、染色
1、 每一个管子中放入1×10⁶个细胞；
2、 样品离心后尽可能完全地移去上清液，并且不要打碎沉淀块；
3、 入1ml的DNA低渗染色缓冲液至沉淀中，并混匀；
4、 样品于4℃下避光30分钟或最长不超过1个小时以备流式细胞仪分析。
注意：延长在低渗缓冲液的曝光时间会引起样品碎片的增加。