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中生网 > 实验技术 > 细胞实验 > 细胞免疫荧光步骤

细胞免疫荧光步骤

更新:2008年09月05日 阅读次数: 【字体:
1.细胞爬片;
2.4%多聚甲醛固定10min(固定细胞器用预冷的70%甲醇+30%丙酮);
3.PBS漂洗5min;
4.0.5% Triton 穿孔15min(丙酮固定法不用透化处理);
5.PBS漂洗2次,每次5min;
6.1%BSA封闭30min;
7.加入1%BSA稀释的一抗,于37℃杂交2h;
8.PBS漂洗2次,每次5min;
9.加入1%BSA稀释的二抗,于37℃杂交1h;
10.PBS漂洗2次,每次5min;
11.5ug/ml DAPI染色2min;
12.抗淬灭封片剂封片。
抗淬灭封片剂:
2.5% DABCO (w/v)
50mM Tris(pH8.0)
90%甘油
关键词:细胞免疫荧光
相关栏目:实验技术 细胞实验
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