一、直标法
全血标本(EDTA抗凝)
在Facoll管中加入一定体积的直标抗体,加入50/100ul全血, 混匀,室温避光孵育15-30分钟(参照说明书)。
加入1ml/2ml溶血素,振荡混匀,避光室温孵育10分钟,1000rpm离心5分钟,弃上清,混匀,加入2ml PBS,1000rpm离心5分钟。
加入0.5-1ml PBS重悬,即可上机检测。
细胞标本(包括红细胞,PBMC,培养细胞及血小板)
在Facoll管中加入一定体积的直标抗体,加入1×106的细胞,混匀,室温避光孵育15-30分钟(参照说明书)。加入2ml PBS,1000rpm离心5分钟,加入0.5-1ml PBS重悬,即可上机检测。
二、间标法
全血标本(EDTA抗凝)
在Facoll管中加入一定体积的纯化抗体,加入50/100ul全血,混匀,室温孵育15-30分钟(参照说明书)。加入1ml/2ml溶血素,振荡混匀,避光室温孵育10分钟。1000rpm离心5分钟,弃上清,混匀,加入2ml PBS,1000rpm离心5分钟,加入一定体积荧光标记二抗,混匀,室温避光孵育15-30分钟。加入1-2ml PBS,1000rpm离心5分钟,加入0.5-1ml PBS重悬,即可上机检测。
细胞标本(包括红细胞,PBMC,培养细胞及血小板)
在Facoll管中加入一定体积的纯化抗体,加入1×106的细胞,混匀,室温孵育15-30分钟(参照说明书)。加入2ml PBS,1000rpm离心5分钟,弃上清,加入一定体积荧光标记二抗,混匀,室温避光孵育15-30分钟。加入1-2ml PBS,1000rpm离心5分钟,加入0.5-1ml PBS重悬,即可上机检测。

