腺病毒感染293的方法

最后更新：2008-9-5 阅读次数： 【字体：小 中 大】

问：最近做重组腺病毒的大量扩增，发现病毒感染293后24 h内细胞即90%变圆，40 h左右半数细胞飘起，不得不在48 h以内就收获细胞。此后降低病毒滴度（减少病毒用量）该现象未见明显改善。根据说明书，我用的感染方法是先用最小体积（如，10 cm皿用1～2 ml）病毒感染，90 min后再补液。据说也有先用稍大体积感染（如10 cm皿用3～4 ml），4～6 h后换液的感染方法，我没有见到有此类方法的报道，没有尝试。请问同仁中做腺病毒感染293细胞都是用哪种方法，如何调整MOI做到2～4 d收获感染的细胞？
答：不知你用的腺病毒（1-2 ml）滴度有多高，是不是病毒用量太大了，我做腺病毒扩增的时候，大概用50-100 μl/瓶（75 cm²），加入病毒前换培养液，之后不用换液，直到3 d左右收集病毒，效果比较好。