脾脏细胞悬液在进行淋巴细胞计数之前最好先去除红细胞（RBC）。胸腺和淋巴结细胞悬液则不必去除红细胞。脾脏细胞的亚群分离也需先去除红细胞。
附加材料：ACK裂解缓冲液。
实验方案：
1. 每个脾脏用约5ml裂解缓冲液悬浮脾脏细胞；一个12ml试管可用于裂解一个或两个脾脏，也可以用50ml离心管裂解更多的脾脏。
2. 室温孵育5min，间以摇动。
3. 加入洗液直至装满容器，以低速离心机上以200g离心10min后弃上清。再洗沉淀一次并以适量培养基重悬以便下一步操作（如去除死细胞、细胞计数或者细胞分离）。
附录：
ACK裂解缓冲液
8.29g NH4Cl（0.15mol/L）
1g KH2CO3（10.0mmol/L）
37.2mg Na2EDTA（0.1mmol/L）
加800ml水，用1mol/L盐酸调PH至7.2～7.4
补加水至1L
0.2μm滤膜过滤除菌
室温保存
