生物实验中常用贮存液的配制方法

贮存液目录：
1．30%丙烯酰胺溶液
2．40%丙烯酰胺
3．放线菌素D溶液
4．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液
5．10mol/L乙酸酰溶液
6．10%过硫酸铵溶液
7．BCIP溶液
8．2×BES缓冲盐溶液
9．1mol/L CaCl2溶液
10．2.5mol/L CaCl2溶液
11．1mol/L二硫苏糖醇（DTT）溶液
12．脱氧核苷三磷酸（dNTP）溶液
13．0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液
14．溴化乙锭（10mg/ml溶液）
15．2×HEPES缓冲盐溶液
16．IPTG溶液
17．1mol/L乙酸镁溶液
18．1mol/L MgCl2溶液
19．β-巯基乙醇（BME）溶液
20．NBT溶液
21．酚/氯仿溶液
22．10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）溶液
23．磷酸盐缓冲溶液（PBS）溶液
24．1mol/L乙酸钾（pH7.5）溶液
25．乙酸钾溶液（用于碱裂解）
26．3mol/L乙酸钠（pH5.2和pH7.0）溶液
27．5mol/L NaCl溶液
28．10%十二烷基硫酸钠（SDS）溶液
29．20×SSC溶液
30．20×SSPE溶液
31．100%三氯乙酸溶液
32．1mol/L Tris溶液
33．Tris缓冲盐溶液（TBS）（25mmol/l Tris）
34．X-gal溶液 

1．30%丙烯酰胺溶液
【配制方法】
　　将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于室温。
【注意】
　　丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。
　　一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。
　　在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。
2．40%丙烯酰胺
【配制方法】
　　把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。
【注意】
　　见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。
3．放线菌素D溶液
【配制方法】
　　把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中，1：10稀释贮存液，用100%乙醇作空白对照读取OD⁴⁴⁰值。放线菌素D（分子量为1255）纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21，900，故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182，放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中，保存于-20℃。
【注意】
　　放线菌素D是致畸剂和致癌剂，配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作，而不能在开放在实验桌面上进行，谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。 　　药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度，这类制品便可用于抑制自身引导作用。
4．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液
【配制方法】
 　　在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0，用蒸馏水定容1ml，分装成小份保存于-70℃。
5．10mol/L乙酸酰溶液
【配制方法】
　　把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后过滤除菌。
6．10%过硫酸铵溶液
【配制方法】
　　把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中，该溶液可在4℃保存数周。
7．BCIP溶液
【配制方法】
　　把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐（BCIP）溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃。
8．2×BES缓冲盐溶液
【配制方法】
　　用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES[N，N-双（2-羟乙基）-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na₂HPO₄，室温下用HCl调节该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成小份，保存于-20℃。
9．1mol/L CaCl₂溶液
【配制方法】
　　在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl₂．6H₂O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20℃。
【注意】
　　制备感受态细胞时，取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml，用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，然后骤冷至0℃。
10．2.5mol/L CaCl₂溶液
【配制方法】
　　在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl₂．6H₂O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。