(1).25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制
|
pH |
1mol/L K2HPO4(ml) |
1mol/L KH2PO4(ml) |
| 5.8 | 8.5 | 91.5 |
| 6.0 | 13.2 | 86.8 |
| 6.2 | 19.2 | 80.8 |
| 6.4 | 27.8 | 72.2 |
| 6.6 | 38.1 | 61.9 |
| 6.8 | 49.7 | 50.3 |
| 7.0 | 61.5 | 38.5 |
| 7.2 | 71.7 | 28.3 |
| 7.4 | 80.2 | 19.8 |
| 7.6 | 86.6 | 13.4 |
| 7.8 | 90.8 | 9.2 |
| 8.0 | 94.0 | 6.2 |
(2).25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制
| pH | 1mol/L Na2HPO4(ml) | 1mol/L NaH2PO4(ml) |
| 5.8 | 7.9 | 92.1 |
| 6.0 | 12.0 | 88.0 |
| 6.2 | 17.8 | 82.2 |
| 6.4 | 25.5 | 74.5 |
| 6.6 | 35.2 | 64.8 |
| 6.8 | 46.3 | 53.7 |
| 7.0 | 57.7 | 42.3 |
| 7.2 | 68.4 | 31.6 |
| 7.4 | 77.4 | 22.6 |
| 7.6 | 84.5 | 15.5 |
| 7.8 | 89.6 | 10.4 |
| 8.0 | 93.2 | 6.8 |
用蒸馏水将混合的两种1mol/L贮存液稀释至1000ml，根据Henderson-Hasselbalch方程计算其pH值：
pH=pK’+1g([质子受体]/[质子供体])
其中，pK’=6.86(25℃)。
2．电泳缓冲液
测序凝胶加样缓冲液：
98%去离子甲酰胺 10mol/L EDTA(pH8.0)
0.025%二甲苯青FF
0.025%溴酚蓝
甲酰胺：许多批号的试剂级甲酰胺，其纯度符合使用要求，无须再进行处理。不过，一旦略呈黄色，则应用在磁力搅拌器上将甲酰胺与Dowex XG8混合床树脂共同搅拌1小时进行去离子处理，并用Whatman 1号滤纸过滤2次，去离子甲酰胺分装成小份，充氮存于-70℃。
常用的电泳缓冲液
| 缓冲液 | 使用液 | 浓贮存液（每升） |
| Tris-乙酸（TAE） | 1×：0.04mol/L Tris-乙酸 | 50×：242g Tris碱 |
| 0.001mol/L EDTA | 57.1ml冰乙酸 | |
| 100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) | ||
| Tris-磷酸（TPE） | 1×:0.09mol/L Tris-磷酸 | 10×:10g Tris碱 |
| 0.002mol/L EDTA | 15.5ml85%磷酸（1.679g/ml） | |
| 40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) | ||
| Tris-硼酸（TBE）a | 0.5×0.045mol/L Tris-硼酸 | 5×：54g Tris碱 |
| 0.001mol/L EDTA | 27.5硼酸 | |
| 20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) | ||
| 碱性缓冲液b | 1×:50mmol/L NaOH | 1×:5ml 10mol/L NaOH |
| 1mmol/L EDTA | 2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0) | |
| Tris-甘氨酸c | 1×:25mmol/L Tris | 5×:15.1g Tris |
| 250mmol/L 甘氨酸 | 94g 苷氨酸（电泳级）（pH8.3） | |
| 0.1% SDS | 50ml 10% SDS(电泳级) |
①.TBE溶液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液，出现沉淀后则予以废弃。以1×TBE作为使用液（即1：5稀释浓贮液）进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1：10稀释的贮存液作为使用液。进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小，故通过缓冲液的电流量通常较大，需要使用1×TBE以提供足够的缓冲容量。
②.碱性电泳缓冲液应现用现配。
③.Tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。
2×SDS凝胶加样缓冲液：
100mmol/L Tris．HCl(6.8)
200mmol/L二硫苏糖醇（DTT）
4%SDS（电泳级）
0.2%溴酚蓝
20%甘油
不含DTT的2×SDS凝胶加样缓冲液可保存于室温，应在临用前取1mol/L贮存液现加于上述缓冲液中。
