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实验技术 > 分子生物学实验 > RNA实验 > RNA的定量与纯度

RNA的定量与纯度

最后更新:2011-5-22 阅读次数: 【字体:

RNA吸光度检测:

RNA通常用分光光度计定量,测量在260 nm处的吸收值(A260)。通常分光光度计A260的读数要介于0.15-1.0之间才是可靠的,因此RNA提取结束后,要根据大概产量稀释(推荐用10 mM Tris.HCl, pH 7.0稀释)到适当浓度范围,再用分光光度计测量。A260为1相当于RNA的浓度为40 µg/mL。

为了检测RNA的纯度,可以测量A260与A280的比值,通常纯RNA的A260/A280为1.9-2.1。

电泳检测:

一般情况下,RNA的电泳都是用变性胶进行的,若只需检测RNA的质量,则琼脂糖胶即可满足。电泳的目的是在于检测28S和18S条带的完整性和他们的比值,或者是mRNA smear的完整性。一般的,如果28S和18S条带明亮、清晰、条带锐利(指条带的边缘清晰),并且28S的亮度在18S条带的两倍以上,RNA的质量比较好。

提示:本文“RNA的定量与纯度”属于RNA实验文章,主要介绍RNA定量RNA的纯度方面的知识,内容仅供学习交流与参考。
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